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講解如何使用DNA合成儀合成亞磷酰胺寡核苷酸

更新時間:2022-03-09      點擊次數(shù):1142
   DNA合成儀就是用于和DNA或RNA結(jié)構(gòu)類似的寡核苷酸合成的自動化儀器,通常用于固相合成法,每次在長的寡核苷酸鏈上接入一個核苷酸。加入每一個核苷酸均通過相同的化學(xué)反應(yīng)和相應(yīng)的嘌呤或嘧啶堿基衍生物作用。

  以亞磷酰胺寡核苷酸合成為例,假如要使用DNA合成儀合成亞磷酰胺寡核苷酸,你就得按規(guī)范來:
 
  1、首先對合成儀上所有試劑瓶中的試劑量認(rèn)真檢查。
  2、然后在合成儀上裝上標(biāo)記好的干凈的收集瓶。在合成儀中輸入要合成的DNA序列。對選擇的合成步驟進行檢查。
  3、選擇結(jié)束方法:儀器的原始狀態(tài)為TritylOffAuto,如果想要通過5,—DMT基團連接純化寡核苷酸,那么將其轉(zhuǎn)變?yōu)門ritylOnAuto結(jié)束狀態(tài)。選擇結(jié)束方法通常是為系統(tǒng)的原始狀態(tài)。
 
  4、將你所希望的保存名字輸入到每個柱監(jiān)視器的Username下。每一個收集瓶相應(yīng)的DNA序列標(biāo)記用代碼代替。將每一個柱設(shè)置的詳細(xì)資料打印出來。對打印出來的資料進行檢查,判斷是否正確。
  5、為了確保合成儀上合成柱處于正確的位置,運行StartColumn步驟對每一個柱的位置進行檢查。
  6、對是否充滿連接在合成儀上的溶劑殘留(廢液瓶)進行檢查。
  7、保證試管充分清潔干凈,保證DMT廢液管路通向分部收集器。
  8、將循環(huán)啟動,運行開始程序?qū)υ噭┕苈愤M行清洗,將原來的試劑除去。

DNA合成儀

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